中药材及中药制剂的显微鉴别
显微鉴别系指用显微镜对药材的 (饮片)切片、粉末、解离组织或表面制片及含药材粉末的制剂中药材的组织、细胞或内含物等特征进行鉴别的一种方法。鉴别时选择有代表性的供试品，根据各品种鉴别项的规定制片。制剂根据不同剂型适当处理后制片。
光学显微镜的构造
- 镜座:基座，稳定和支持整个镜体
- 镜柱:支持镜臂。
- 镜臂:支持镜筒，拿镜时握持此臂。
- 镜筒:
- 物镜转换器:物镜孔，可安装不同放大率的物镜。
- 镜台:
- 调节器:分粗调和细调，细调在一圈范围内调
二、照明部分
- 反光镜(光源): 强时用平光镜，弱时用凹面镜。
- 聚光器
- 光圈光阑。
三、光学放大部分
- 目镜:5X，10X，15X，内可放测微尺
- 物镜:低倍，镜筒短，筒径粗，5X；高倍，镜筒长，筒径细，40X，45X
- 油镜:镜筒最长，80X，85X.
光学显微镜的使用
一、低倍镜的用法
- 取镜:注意小心平稳轻放。
- 准备:
- 对光:
- 上片:注意有盖玻片的向上，注意取盖玻片时的拿法。
- 调节物距:注意先把低倍镜调至距玻片0.5厘米的样子—粗调—然后缓慢使物镜上调，直至视野里出现可见物。
- 注意两个要领:一是慢，二是距离只允许调大不允许调小。
- 标本片与物象移动方向相反。
- 如果调过了必须从头再来一次，直至视野里出现物象。
二、高倍镜的用法
- 用高倍镜的方法须在低倍镜取像的情况下，换高倍镜头，调节微调旋钮直至看清物象。调节范围在一圈以内。
显微镜的维护
- 取镜时应一手紧握镜臂一手平托镜座。安放好的盒微镜就不要随意搬动。
- 使用前后，检查镜头和镜体，严禁随意拆卸。
- 保持清洁，避免灰尘和潮湿。避免阳光直射。远离挥发性和腐碰性花学试剂。
- 镜筒下降时，眼睛一定要看着物镜。
- 使用显微镜时，一定要稳重、谨慎、轻拿轻放.显微镜不要放在实验桌的边缘，以防跌落地面。
- 实验完毕，把显微镜擦拭干净。再转动镜头转换器，把两个物镜偏到两旁。最后把显微镜放进镜箱里，送回原处保存。
显微测微器的使用
显微测微尺是用来测量细胞在显微镜下长度的工具，由目镜测微尺和镜台测微尺组成，两尺配合使用。
- 目镜测微尺 放在目镜筒内的一种标尺，为一个直径18~22mm的圆形玻璃片，中央刻有精确等距离的平行线刻度，常为50格或100格
- 载物台测微尺 在特制的载玻片中央粘贴一刻有精细尺度的圆形玻片。通常将长1mm(或2mm)精确等分成100(或200)小格，每1小格长为10um,用以标定目镜测微尺
- 目镜测微尺的标定 用以确定使用同一显微镜及特定倍数的物镜、目镜和镜筒长度时，目镜测微尺上每一格所代表的长度。
- 取载物台测微尺置显微镜载物台上，在高倍物镜(或低倍物镜)下，将测微尺刻度移至视野中央。将目镜测微尺(正面向上)放入目镜镜筒内，旋转目镜，并移动载物台测微尺，使目镜测微尺的“0”刻度线与载物台测微尺的某刻度线相重合，然后再找第二条重合刻度线，根据两条重合线间两重合线间两种测微尺的小格数，计算出目镜测微尺每一小格在该物镜条件下相当的长度(um)，如目镜测微尺77小格 (0~77) 与载物台 测微尺的30小格(0.7~1.0) 相当，已知载物台测微尺每一小格的长度为10um。目镜测微尺每一小格长度为:10um*30/77=3.8um。
- 当测定时要用不同的放大倍数时，应分别标定。
- 测量方法 将需测量的目的物显微制片置显微镜载物台上，用目镜测微尺测量目的物的小格数，乘以上述每一小格的微米数。通常是在高倍镜下测量，但欲测量较长的目的物，如纤维、导管、非腺毛等的长度时，需在低倍镜下测量。
- 记录最大值与最小值 (um)，允许有小量数值略高或略低于规定。
药材显微制片
横切片或纵切片制片 取供试品欲观察部位，经软化处理后，用徒手或滑走切片法，切成10~20um的薄片,必要时可包埋后切片。选取平整的薄片置载玻片上，根据观察对象不同，滴加甘油醋酸试液、水合氯醛试液或其他试液1~2滴，盖上盖玻片必要时滴加水合氯醛试液后，在酒精灯上加热透化，并滴加甘油乙醇试液或稀甘油盖上盖玻片。
粉末制片
供试品粉末过四号筛，挑取少许置载玻片上，滴加甘油醋酸试液、水合氯醛试液或其他适宜的试液，盖上盖玻片。必要时，按上法加热透化。
表面制片
将供试品湿润软化后,剪取欲观察部位约4mm2，一正一反置载玻片上，或撕取表皮，加适宜的试液或加热透化后，盖上盖玻片。
解离组织制片
将供试品切成长约5mm、直径约2mm的段或厚约1mm的片，如供试品中薄壁组织占大部分，木化组织少或分散存在，采用氢氧化钾法，若供试品质地坚硬，木化组织较多或集成较大群束，采用硝铬酸法或氯酸钾法。
- 氢氧化钾法 置供试品于试管中，加5%氢氧化钾溶液适量，加热至用玻璃棒挤压能离散为止，倾去碱液，加水洗涤后，取出少量置载玻片上，用解剖针撕开，滴加稀甘油，盖上盖玻片。
- 硝铬酸法 置供试品于试管中,加硝铬酸试液适量，放置，至用玻璃棒挤压能离散为止，倾去酸液，加水洗涤后，照上法装片。
- 氯酸钾法 置供试品于试管中，加硝酸溶液(1一2)及氯酸钾少量,缓缓加热，待产生的气泡渐少时，再及时加入氯酸钾少量，以维持气泡稳定地发生，至用玻璃棒挤压能离散为止，倾去酸液，加水洗涤后，照上法装片。
花粉粒与孢子制片
- 取花粉、花药(或小的花朵)、孢子或孢子囊群(干燥供试品浸于冰醋酸中化)，用玻璃棒研碎，经纱布过滤离心管中，离心，取沉淀加新鲜配制的醋酐与硫酸(9：1)的混合液1~3ml，置水浴上加热2~3分钟，离心，取沉淀，用水洗涤2次。
- 取沉淀少量置载玻片上，滴加水合氯醛试液，盖上盖玻片，或加50%甘油与1%苯酚各1~2滴，用品红甘油胶[取明胶1g，加水6ml，浸泡至溶化，再加甘油7ml，加热并轻轻搅拌至完全混匀，用纱布过滤至培养皿中，加碱性品红溶液(碱性品红0.1g，加无水乙醇600ml及樟油80ml，溶解)适量，混匀，凝固后即得]封藏。
磨片制片
坚硬的动物、矿物类药，可采用磨片法制片。选取厚度约1~2mm的供试材料，置粗磨石(或磨砂玻璃板)上，加适量水，用食指、中指夹住或压住材料，在磨石上往返磨砺，待两面磨平，且厚度约数百微米时，将材料移置细磨石上，加水，用软木塞压住在材料上，往返磨砺至透明，用水冲洗，再用乙醇处理和甘油乙醇试液装片。
含药材粉末的制剂显微制片
- 按供试品不同剂型，散剂、胶囊剂(内容物为颗粒状，应研细)，可直接取适量粉末:片剂取2~3片，水丸、糊丸、水蜜丸、锭剂等(包衣者除去包衣)，取数丸或1~2锭，分别置乳钵中研成粉末，取适量粉末;
- 蜜丸应将药丸切开，从切面由外至中央挑取适量样品或用水脱蜜后，吸取沉淀物少量。根据观察对象不同，分别按粉末制片法制片 (1~5片)。
细胞壁性质的鉴别
- 木质化细胞壁 加间苯三酚试液1~2滴，稍放置，加盐酸1滴,因木质化程度不同,显红色或紫红色。
- 木栓化或角质化细胞壁 加苏丹III试液，稍放置或微热，显橘红色至红色
- 纤维素细胞壁 加氯化锌碘试液，或先加碘试液湿润后，稍放置,再加硫酸溶液(33-50);显蓝色或紫色。
- 硅质化细胞壁 加硫酸无变化。
细胞内含物性质的鉴别
- 淀粉粒
- 加碘试液，显蓝色或紫色。
- 用甘油醋酸试液装片，置偏光显微镜下观察，未糊化的淀粉粒显偏光现象；已糊化的无偏光现象。
- 糊粉粒
- 加碘试液，显棕色或黄棕。
- 加硝酸汞试液,显砖红色。材料中如含有多量脂肪油，宜先用乙醚或石油酬脱脂后进行试验。
- 脂肪油、挥发油或树脂
- 加苏丹Ⅲ试液，显橘红色、红色或紫红色。
- 加90%乙醇，脂肪油和树脂不溶解(蓖麻油及巴豆油例外)，挥发油则溶解。
- 菊糖 加10%α-萘酚乙醇溶液，再加硫酸，显紫红色并溶解。
- 黏液 加钌红试液，显红色。
- 草酸钙结晶
- 加稀醋酸不溶解，加稀盐酸溶解而无气泡发生。
- 加硫酸溶液 (1-2)，逐渐溶解，片刻后析出针状硫酸钙结晶。
- 碳酸钙(钟乳体) 加稀盐酸溶解，同时有气泡发生。
- 硅质 加硫酸不溶解。
